为什么斐林试剂必须现配现用,混合均匀了才能用,双缩脲试剂可以A液和B液分别加入都没问题?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/07 03:26:29
为什么斐林试剂必须现配现用,混合均匀了才能用,双缩脲试剂可以A液和B液分别加入都没问题?

为什么斐林试剂必须现配现用,混合均匀了才能用,双缩脲试剂可以A液和B液分别加入都没问题?
为什么斐林试剂必须现配现用,混合均匀了才能用,双缩脲试剂可以A液和B液分别加入都没问题?

为什么斐林试剂必须现配现用,混合均匀了才能用,双缩脲试剂可以A液和B液分别加入都没问题?
斐林试剂实际上用的就是新制Cu(OH)2,此时的氢氧化铜处于胶体状态.如果放置过久的话,氢氧化铜完全沉淀,反应无法发生.所以现配现用.
蛋白质中的肽键在碱性条件下才会和铜离子作用生成紫色物质,此反应需要在碱性条件下发生
如果先加CuSO4由于不是碱性条件,
更糟糕的是硫酸铜中的铜离子为重金属离子,会导致蛋白质变性、沉淀,沉淀后的蛋白质,再加入碱也不会生成紫色物质了

斐林试剂使用实质是新配制的氢氧化铜反应,双缩脲试剂实质是碱性条件下铜离子与肽键的络合反应

因为斐林试剂是要氢氧化钠与硫酸铜反应,生成氢氧化铜,与还原糖反应产生氧化亚铜砖红色沉淀,而斐林试剂不稳定,久置会生成黑色的氧化铜
而双缩脲中的二价铜离子与蛋白质的反应要在碱性条件下反应,所以氢氧化钠只是提供碱性环境罢了

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