SacI和BamHI 50微升的体系怎么配制?

SacI和BamHI 50微升的体系怎么配制? SacI 和BamHI 双酶切 用什么buffer SacI XbaI双酶切体系,我以前用的50微升体系,现在想用20微升体系,关键是BUFFER的浓度,我曾经用过50体系中两种酶各1，BUFFER用了5，那要是20的体系呢，BUFFER还是1X的么？ 哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点?现在需要连T,但是Pcr引物两端加了SacI和BamHI这两个酶切位点,所以需要找一个合适的T载体. pcr反应体系中引物浓度20uM指的是什么,还有20微升体系怎么换算成50微升体系呢, pcr 25微升 体系的各种组分具体是怎么加的? 设计引物加哪个酶切位点pQE30表达载体上常用的酶切位点有BamHI、 SacI 、KpnI 、SmaI 、PstI、 HindIII ,现预克隆的一段基因上有EcoRI、HindIII、SacI、AccI、PstI等酶切位点,那么在设计引物时候可以在 Takara的NheI 和BamHI双酶切体系表中没有双酶切缓冲体系应该如何选用缓冲液呢?只能进行分步酶切吗? PCR 怎样稀释做50微升体系的PCR使用的引物浓度是多少?怎样稀释? 酶切反应体系中是10微升的好还是20微升的好? mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带 但是做了50微升体系的之后跑电泳 许多不出条带 要不就是有拖带 这种情况是怎么回事 PCR反应体系中dNTP的浓度怎么算?我的反应总体积20微升,其中加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM,1mL. 【跪求】我的PCR体系应该怎么设定?退火温度?我做一种真菌的pcr,引物序列左：aatcgacccgtttccgcctt, 右：gttagattgaccgcgattcc,生工合成单给的退火温度分别是59.85和57.8我的25微升体 PCR 50ngDNA 与多少微升 怎么换算 怎样找BamHI和EcoRV酶切时可以兼容酶的缓冲液? 建筑结构体系和类别怎么分的? 载体双酶切后消失,怎样解决我用的是bamh1,xho1两个酶（Fermentas公司的,用的是bufferR）,双酶切pFastBac1这个载体,50微升反应体系,只切3个小时,各用1微升的酶,跑胶一点都看不到有大片段,可以看到 载体双酶切后消失,怎样解决我用的是bamh1,xho1两个酶（Fermentas公司的,用的是bufferR）,双酶切pFastBac1这个载体,50微升反应体系,只切3个小时,各用1微升的酶,跑胶一点都看不到有大片段,可以看到